Proliferasi dan diferensiasi sel merupakan mekanisme fi siologis penting bagi perkembangan dan regenerasi organ. Secara mikroanatomi, kolagen merupakan bagian matriks ekstraseluler yang terbukti menginduksi perbaikan sel otot. Namun, pada kasus kerusakan otot yang berat, kolagen di dalam tubuh tidak cukup untuk mengompensasi hilangnya sel akibat nekrosis. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh substrat kolagen terhadap laju proliferasi dan diferensiasi mioblas. Mioblas C2C12 sebanyak 1 × 10 sel/ ml dikultur pada medium α-MEM+ FBS 10%+ PS. Proliferasi dan diferensiasi sel diamati pada hari ke-1, 3, 5, 7 dan 9. Sel dihitung dengan menggunakan cell counter coulter, sedangkan diferensiasi sel diamati menggunakan mikroskop fase kontras. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pertumbuhan sel pada substrat kolagen berbeda signifikan dengan substrat tanpa kolagen ditunjukkan dengan taraf signifi kansi hasil uji t yaitu0.000 (p < 0,05).Hasil uji regresi menunjukkan pola pertumbuhan keduanya sama-sama meningkat selama 9 hari namun angka peningkatan pertumbuhan sel pada substrat kolagen lebih tinggi 3 kali lipat. Dengan meningkatnya pertumbuhan sel dan densitas kultur sel, kolagen juga dapat mempercepat diferensiasi mioblas menjadi miotubulus dan serat otot. Penelitian ini menjadi studi awal dikembangkannya terapi untuk memperbaiki kerusakan otot.