Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kompetensi profesional guru biologi Madrasah Aliyah Negeri di kota Medan dalam aspek penguasaan bahan pengajaran, penyusunan program pengajaran, pelaksanaan program pengajaran, dan menilai hasil dan proses belajar-mengajar yang telah dilaksanakan. Populasi penelitian ini adalah seluruh guru biologi Madrasah Aliyah Negeri di kota Medan. Sampel penelitian dipilih secara acak sebanyak 16 orang guru yang berasal dari empat madrasah yang ditentukan secara purposive sampling berdasarkan masa tugas. Data dikumpulkan dengan cara pemberian uji kompetensi penguasaan bahan pengajaran, pengkajian dokumen RPP, pengamatan dan penilaian pelaksanaan pengajaran, dan kuesioner menilai hasil dan proses belajar- mengajar yang telah dilaksanakan; selanjutnya dianalisis secara statistik deskriptif. Hasil analisis data menunjukkan aspek penguasaan bahan pengajaran dengan nilai rata-rata 71,75, penyusunan program pengajaran dengan nilai rata-rata 95,40, pelaksanaan program pengajaran dengan nilai rata-rata 91.30, dan menilai hasil dan proses belajar-mengajar yang telah dilaksanakan dengan nilai rata-rata 63,10. Secara keseluruhan nilai rata-rata kompetensi profesional guru biologi Madrasah Aliyah Negeri di kota Medan 80,34 dengan kategori sangat tinggi.