Penyebab tertinggi kematian dan kesakitan pada masa nifas (45,16%) yaitu salah satunya infeksi pada masa nifas. Berdasarkan data rekam medik di Rumah Sakit Umum Raden Mattaher Provinsi Jambi angka kejadian Mastitis pada tahun 2013 berjumlah 2 orang ibu nifas, pada tahun 2014 mengalami peningkatan berjumlah 5 orang ibu nifas dan pada tahun 2015 kembali mengalami peningkatan dengan jumlah 6 orang ibu nifas Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui hubungan personal hygiene, teknik menyusui, dan peran keluarga dengan pencegahan mastitis di wilayah Kerja Puskesmas Putri Ayu Kota Jambi tahun 2016. Penelitian ini merupakan penelitian kuantitatif dengan rancangan deskriptif analitik dengan desain cross sectional Penelitian ini dilakukan pada tanggan 25 juli – 04 agustus 2016. Populasi pada penelitian ini sebanyak 34 ibu dan sampelnya sebanyak 34 ibu. Teknik pengambilan sampel menggunakan total sampling, dimana penelitian ini dilakukan dengan menggunakan kuesioner dengan cara pengisian kuesioner, dan dianalisis menggunakan univariat dan bivariat. Hasil penelitian menunjukan bahwa ada hubungan antara personal hygiene dengan pencegahan mastitis dengan nilai p-value 0,024, ada hubungan antara teknik menyusui dengan pencegahan mastitis dengan nilai p-value 0,020, dan ada hubungan antara peran keluarga dengan pencegahan mastitis dengan nilai p-value 0,008. Diharapkan kepada petugas kesehatan memberikan penyuluhan tentang personal hygiene, teknik menyusui dengan pencegahan mastitis agar ibu nifas